Máquina de extracción e detección de ácidos nucleicos totalmente automática de New Tech

Cinco forzas:
● Instrumento configurado coa etapa de extracción e purificación de ácidos nucleicos
● Instrumento configurado con módulo de extracción ultrasónica
● Instrumento configurado con totalmente automático
● Instrumento configurado con amplificación de temperatura variable
● Instrumento configurado con kit de reactivos totalmente pechado

1. Os reactivos de detección de ácidos nucleicos deben ser extraídos e purificados?
O principio da detección de ácidos nucleicos é o seguinte: baixo a acción do cebador, a ADN polimerase utilízase para realizar a amplificación da reacción en cadea sobre ADN/ARN modelo (que require a transcrición inversa de NA), e despois detéctase a cantidade de sinal fluorescente liberado para determinar se a mostra contén o ácido nucleico (ADN/ARN) do patóxeno que se vai detectar.

1) As mostras que non foron extraídas ou purificadas poden conter moitos compoñentes que afectan o resultado final: nuclease (que pode disolver o ácido nucleico obxectivo e causar falso negativo), protease (que pode reducir a ADN polimerase e causar falso negativo), metal pesado. sal (o que leva á inactivación da sintasa e provoca falsos positivos), PH demasiado ácido ou demasiado alcalino (o que pode provocar o fallo da reacción), ARN incompleto (que provoca un fallo de transcrición inversa falso negativo).

2) Algunhas mostras son difíciles de amplificar directamente: os grampositivos e algúns parasitos, debido ás súas grosas paredes celulares e outras estruturas, se non pasan polo proceso de extracción e purificación de ácidos nucleicos, o kit sen extracción pode fallar para tales. mostras.

Polo tanto, recoméndase seleccionar o kit de proba ou o instrumento configurado coa etapa de extracción de ácido nucleico.

2. Extracción química ou extracción por fragmentación ultrasónica física?
En xeral, a extracción química pódese aplicar á maior parte do pretratamento e purificación.Non obstante, nas bacterias Gram-positivas de paredes grosas e nalgúns parasitos, tamén se dá o caso de que a extracción química non pode obter modelos eficaces de ácidos nucleicos, o que provoca unha detección de falsos negativos.Ademais, a extracción química adoita usar axentes fortes, se a elución non é completa, é fácil introducir álcalis fortes no sistema de reacción, o que resulta en resultados imprecisos.

A fragmentación ultrasónica utiliza o triturado físico, que foi utilizado con éxito por GeneXpert, unha empresa líder no campo da POCT para uso humano, e ten unha vantaxe absoluta na extracción de ácidos nucleicos dalgunhas mostras complexas (como Mycobacterium tuberculosis).

Polo tanto, recoméndase seleccionar un kit de proba ou instrumento configurado cun paso de extracción de ácido nucleico.e é óptimo se hai un módulo de extracción ultrasónico.

3. Manual, semiautomático e totalmente automático?
Este é un problema de custo laboral e de eficiencia laboral.Na actualidade, os hospitais de animais carecen de persoal suficiente, e a extracción e detección de ácidos nucleicos é un traballo que require certas habilidades e experiencia.Non hai dúbida de que a máquina de extracción e detección de ácidos nucleicos totalmente automática é a opción perfecta.

4. Amplificación de temperatura constante ou amplificación de temperatura variable?
A reacción de amplificación é un enlace de detección de ácidos nucleicos, e a tecnoloxía profesional implicada neste enlace é complexa.En liñas xerais, as encimas úsanse para amplificar o ácido nucleico.No proceso de amplificación, detéctase o sinal de fluorescencia amplificado ou o sinal de fluorescencia incorporado.En xeral, canto antes apareza o sinal de fluorescencia, maior será o contido do xene obxectivo da mostra.

A amplificación de temperatura constante é unha amplificación de ácidos nucleicos a unha temperatura fixa, mentres que a amplificación de temperatura variable é unha amplificación cíclica estrictamente segundo desnaturalización-recocido-extensión.Realizouse o tempo de amplificación de temperatura constante, mentres que o tempo de amplificación de temperatura variable vese moi afectado pola taxa de aumento e descenso da temperatura do instrumento (na actualidade, moitos fabricantes puideron facer 40 ciclos de amplificación nuns 30 minutos).

Se as condicións do laboratorio son boas e a zonificación é estrita, é razoable dicir que a diferenza de precisión entre ambos non será grande.Non obstante, a amplificación de temperatura variable sintetizará máis produtos de ácidos nucleicos nun tempo relativamente máis curto.Para os laboratorios sen zonificación estrita e persoal de formación profesional, o risco de fuga de aerosois de ácido nucleico será maior, o falso positivo prodúcese unha vez que se produce a fuga e é extremadamente difícil de eliminar.

Ademais, a amplificación de temperatura constante tamén é máis propensa á amplificación non específica cando a mostra é complexa (a temperatura de reacción relativa é máis baixa e canto maior sexa a temperatura de extensión, mellor será a especificidade de unión do cebador).

No que se refire á tecnoloxía actual, a amplificación de temperatura variable é máis fiable.

5. Como evitar o risco de fuga de produtos de amplificación de ácidos nucleicos?
Na actualidade, moitos fabricantes elixen o tubo de PCR de tipo glándula como tubo de reacción de ácido nucleico, que está selado por fricción, e a desnaturalización da temperatura na desnaturalización da temperatura variable na amplificación da PCR de temperatura variable alcanza os 90 graos.
Centígrados.O proceso repetido de expansión con calor e contracción con frío é un gran desafío para o selado do tubo de PCR, e o tubo de PCR tipo glándula é relativamente fácil de causar fugas.

É preferible adoptar a reacción cun kit/tubo completamente selado para evitar a fuga do produto de reacción.Sería perfecto se puidese elaborar un kit totalmente selado para a extracción e detección de ácidos nucleicos.

Así, a nova máquina de extracción e detección de ácidos nucleicos totalmente automática de New Tech ten as cinco opcións óptimas anteriores.